技術(shù)文章
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在現(xiàn)代分析化學(xué)領(lǐng)域,HILIC(親水相互作用色譜)色譜柱以其特殊的優(yōu)勢,在分離分析復(fù)雜樣品中的極性和親水性化合物方面發(fā)揮著重要作用。下面我們就來深入了解一下HILIC色譜柱的原理及使用過程中的注意事項(xiàng)。HILIC色譜柱的原理基于溶質(zhì)分子與固定相之間的親水相互作用。其固定相通常采用...
ES-CN色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。ES-CN色譜柱對高沸點(diǎn)、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門。在選擇ES-CN...
聚糖色譜柱是一種基于Fused-Core技術(shù)的快速、高效型液相色譜柱。它通過創(chuàng)新的專有化學(xué)鍵合技術(shù),將五羥基配體鍵合到硅膠的多孔殼層。這種高性能材料的色譜柱可用于親水作用色譜,以常規(guī)反相溶劑為流動(dòng)相,分離低聚糖,尤其是蛋白質(zhì)連接的聚糖。聚糖色譜柱是基于《2015版中國藥典》中關(guān)于β-內(nèi)酰胺類抗生素中高分子雜質(zhì)的分析而專門開發(fā)的專用色譜柱,適于《2015版中國藥典》中規(guī)定的阿莫西林高分子聚合物、頭孢拉定高分子聚合物、頭孢曲松高分子聚合物和頭孢他啶高分子聚合物等多種抗生素高分子聚...
色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成...
苯基色譜柱是苯基通過碳鏈連接鍵合于硅膠基質(zhì)上。連接的碳鏈以3個(gè)C較常見,還有一些采用4個(gè)或者更多的碳鏈來鍵合。4個(gè)或者更多的碳鏈連接在某種程度上可以使苯環(huán)與被分析芳香化合物苯環(huán)能夠更好地接觸。苯基鍵合相由于碳鏈的存在,所以具有一定的疏水保留能力,而苯環(huán)的存在又為芳香化合物提供了較佳的選擇性。因?yàn)楸江h(huán)可以與芳香化合物之間形成π-π相互作用,從而提供了與C18不同的選擇性。而對于苯環(huán)上含有吸電子基團(tuán)的化合物,苯基柱的保留很強(qiáng)。苯基色譜柱的使用:苯基相為π-堿性(給電子),與烷基相...
C30色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。C30色譜柱的安裝與保存方法:安裝方法:1、首先應(yīng)確認(rèn)柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進(jìn)樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使...
反相色譜的影響因素:(1)柱長有機(jī)小分子和肽類的分辨率隨柱長的增加而增加.但是柱長增加并不能使蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的分辨率顯著增加.它們在較短的柱子上往往也有很好的分離效果。(2)流動(dòng)相的流速。有機(jī)小分子和肽類的分辨率對流動(dòng)相流速非常敏感。而蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的分辨率則不然。流速越小,柱子越長,色譜峰的寬度就越大,分辨率就越小。制備色譜上樣過程中的流速對動(dòng)態(tài)吸附容量影響很大。(3)溫度。溫度上升,流動(dòng)相黏度下降,流動(dòng)速度加快,且流動(dòng)相與固定相之間的傳質(zhì)速度加快,使分...
C4色譜柱是一款適合于蛋白質(zhì)分離分析用的產(chǎn)品。它使用3微米粒徑的硅膠填料,優(yōu)化了孔徑,固定相配體的烷基鏈長及表面鍵合密度,可實(shí)現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析。使用短柱可以在高流速下實(shí)現(xiàn)快速分析。C4色譜柱在使用前,先進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照C4色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。但要注意柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。1、樣品的前處理:①先使用流動(dòng)相溶解樣品;②...
HALO聚糖色譜柱是一種基于Fused-Core®技術(shù)的快速、高效型液相色譜柱。HALOGlycan是一種高極性固定相,通過創(chuàng)新的專有化學(xué)鍵合技術(shù),將五羥基配體鍵合到硅膠的多孔殼層。這種高性能材料的色譜柱可用于親水作用色譜(HILIC),以常規(guī)反相溶劑為流動(dòng)相,分離低聚糖,尤其是蛋白質(zhì)連接的聚糖。鍵合相:專有的親水配體,HALOGlycan色譜柱USP分類:L95粒徑大?。?.7μm孔徑大小:90A聚糖色譜柱優(yōu)勢及最佳應(yīng)用:①提高酸性和兩性離子的保留;②對鹽濃度不敏感...
反相色譜柱是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料,因此有較高的碳含量和更好的疏水性,對各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力,適用范圍較廣,是高效液相色譜儀分析中首要選擇的色譜柱類型。目前,反相色譜柱適用范圍廣,從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離,在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學(xué),生藥學(xué)和天然產(chǎn)物化學(xué),生物物質(zhì)如多肽、蛋白、核酸等多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。反相色譜柱的結(jié)構(gòu)及主要功能:本產(chǎn)品是由柱管、接頭、封頭、密封環(huán)、壓帽、篩板、柱填料等組成。1、柱管:多用不銹鋼制成,壓力不高于...
色譜柱由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20μm(5~10&μm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。色譜柱的作用機(jī)理:可以被認(rèn)為是反相液相色譜...
Dewetting孔去濕現(xiàn)象在方法開發(fā)時(shí)需要考慮的一個(gè)重要因素就是固定相的“孔去濕”。當(dāng)固定相為高疏水(如C18),且流動(dòng)相從一個(gè)高有機(jī)相組分(40%乙腈或甲醇)變到另一個(gè)純水相或高水相組分的時(shí)候,就容易發(fā)生。這也是早期反相色譜柱常常遇到的問題。色譜柱在高壓條件下,流動(dòng)相中的水會(huì)被“壓入”起保留作用的固定相孔結(jié)構(gòu)里;當(dāng)泵停止后,水則不會(huì)再進(jìn)入固定相孔內(nèi)。同時(shí),由于固定相是疏水的,滯留于色譜柱中的水被從固定相孔結(jié)構(gòu)中排出。在重啟色譜泵后,即使是高壓也無法使流動(dòng)相中的水重新回到固...
C18色譜柱根據(jù)極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN、-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(tuán)(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還C8、C4、C2和苯基柱等。C18色譜柱的構(gòu)造:由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的...