技術(shù)文章
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在現(xiàn)代分析化學(xué)領(lǐng)域,HILIC(親水相互作用色譜)色譜柱以其特殊的優(yōu)勢,在分離分析復(fù)雜樣品中的極性和親水性化合物方面發(fā)揮著重要作用。下面我們就來深入了解一下HILIC色譜柱的原理及使用過程中的注意事項。HILIC色譜柱的原理基于溶質(zhì)分子與固定相之間的親水相互作用。其固定相通常采用...
為了最大限度地延長高效液相色譜柱的使用壽命并確保其最佳性能,有必要對色譜柱進(jìn)行適當(dāng)?shù)木S護(hù)。許多不同因素可能導(dǎo)致色譜柱分離度和靈敏度降低,但通常情況下,下列因素會導(dǎo)致絕大多數(shù)色譜柱出現(xiàn)性能問題。1、污染物通常,樣品中含有來源于樣品基質(zhì)的成分,這些成分可能會吸附于色譜柱之上。鹽、脂類、增塑劑和聚合物是在分析過程中可能與固定相接觸的成分。這些成分會損壞色譜柱和檢測器,并在分析過程中出現(xiàn)雜質(zhì)峰。如果這些雜質(zhì)成分不能被流動相洗脫,它們就會吸附在色譜柱上。隨著時間的推移,分析物會與這些雜...
HALO色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點。HALO色譜柱對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門。在選擇HALO色譜柱...
AMT公司為您富有挑戰(zhàn)的分離量身定做了多種孔徑,那么如何選擇正確的孔徑呢??根據(jù)您的分子大小和樣品中分析物的分子量范圍(MWs)來匹配填料孔徑(表A)。?小分子(®90?分析。-較小孔徑的填料具有更大的比表面積,可提高小分子分析物的保留和載量。-當(dāng)分析物與柱填料孔徑的比例大于0.1時,其在填料上的擴(kuò)散就會嚴(yán)重受阻,從而導(dǎo)致峰展寬和保留變差。?對于大環(huán)抗生素和多肽蛋白生物分子,應(yīng)使用較大的孔徑,如HALO®160?Peptide和HALO®400?Pro...
在分離度方程式中有三個變量:柱效(N)、選擇性(α)及保留因子(K)。我們可以看出,選擇性(α)是調(diào)整和提高分離度有效的參數(shù)。同時,色譜柱固定相是調(diào)整HPLC選擇性(見表B)中四個有效的參數(shù)之一。當(dāng)然,對于離子化分析物,流動相pH是有效的調(diào)節(jié)參數(shù)。此外,與色譜柱固定相同樣重要的還有流動相中有機溶劑(乙腈vs甲醇)的選擇、及有機溶劑含量/梯度斜率等等。在開發(fā)一個色譜分析方法時,可以有多種方式來實現(xiàn)特定的分離和保留需求。一種是采取系統(tǒng)篩選多個固定相的方式,針對不同的分析,HALO...
柱外體積(ECV)是指色譜系統(tǒng)從進(jìn)樣器到檢測器這段管路除去色譜柱的總體積。大部分新的高效液相色譜系統(tǒng)都經(jīng)過了優(yōu)化,因此,可以使用高效的核殼顆粒(SPP)色譜柱,例如HALO?,F(xiàn)在讓我們簡單概述一下高效液相色譜系統(tǒng)。一個典型的HPLC系統(tǒng)由脫氣機、泵、自動進(jìn)樣器、柱溫箱和檢測器。我們可以仔細(xì)看一下里面。柱外體積通常來自進(jìn)樣器,包括進(jìn)樣器本身、連接進(jìn)樣器與色譜柱的管路以及連接色譜柱與檢測器的管路、檢測器流通池、熱交換器以及各個連接配件所產(chǎn)生的任何體積。但是有很多舊的色譜儀仍在使用...